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鼎國自產動物組織 DNA 提取試劑盒

簡要描述：

本試劑盒采用自主研發(fā)的*裂解液和酶相結合的方法裂解材料，具有效率高、性能穩(wěn)定、重復性高、速度快等特點。材料被裂解并、經蛋白酶K消化后，DNA在高鹽低pH的條件下，與硅基質膜特異性結合，在低鹽高pH值條件下，吸附的DNA被洗脫下來。本試劑盒適用于各種動物組織、動物細胞和血液基因組DNA的提取。提取的基因組DNA可以直接用作PCR模板、酶切、雜交等分子生物學實驗。

更新時間：2024-06-12

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詳細介紹

鼎國自產動物組織 / 細胞 / 血液基因組 DNA 提取試劑盒 ；350元

純化效果檢測

取2-5μl得到的DNA產物，0.7%agarose電泳檢測DNA分子的完整性和紫外分光光度計檢測濃度和純度。
DNA在260nm處有吸收峰，檢測時應該使OD₂₆₀值在0.1到1.0之間數值較準確。
OD₂₆₀為1時大概相當于50μg/ml雙鏈DNA，40μg/ml單鏈DNA。
核酸濃度（μg/ml）=OD₂₆₀×50×稀釋倍數。
OD₂₆₀/OD₂₈₀的值應該為1.7~2.0。
常見問題分析：

常見問題	可能原因	建議
柱子堵塞	裂解消化不充分	適當延長Proteinase K消化時間。
柱子堵塞	樣品過多	樣品量不要超過說明書所定zui大量；可適當增加Proteinase K的用量
DNA產量低	將沉淀倒入柱子導致柱子堵塞	加大轉速和延長離心時間
	Wash buffer A、Wash buffer B沒有加無水乙醇	按說明書加入無水乙醇
	洗脫效率低	洗脫液使用前于55-65℃預熱；洗脫液pH值不合適，應保證在7.5~8.5
	樣品裂解不*	適當延長裂解時間。
	樣品不夠新鮮	盡量使用新鮮樣品
DNA純度低	消化不*	樣品量不要超過規(guī)定范圍；延長消化時間，使樣品充分消化
	洗滌不當	嚴格按照說明書步驟洗脫
	乙醇未除干凈	適當延長晾干時間，使乙醇充分揮發(fā)

產品簡介：
本試劑盒采用自主研發(fā)的*裂解液和酶相結合的方法裂解材料，具有效率高、性能穩(wěn)定、
重復性高、速度快等特點。材料被裂解并、經蛋白酶K消化后，DNA在高鹽低pH的條件下，
與硅基質膜特異性結合，在低鹽高pH值條件下，吸附的DNA被洗脫下來。
本試劑盒適用于各種動物組織、動物細胞和血液基因組DNA的提取。
提取的基因組DNA可以直接用作PCR模板、酶切、雜交等分子生物學實驗。
組成：

成分	50次	注意事項
RNase A	0.5 ml	-20℃保存
Proteinase K	0.5 ml	-20℃保存
Lysis Buffer A	35 ml	室溫低時可能有白色沉淀產生，加熱溶解即可
Lysis Buffer B	25 ml
Wash buffer A	27 ml	用前加入18 ml 無水乙醇，充分混勻
Wash buffer B	16 ml	用前加入64 ml無水乙醇，充分混勻
Elution Buffer	10 ml
離心柱	50個	單個zui大吸附量20 μg
紅細胞裂解液	50ml	4℃

可選試劑

編號	品名	規(guī)格	價格
NEP033	紅細胞裂解液	100ml	40.00

實驗前試劑準備

Wash buffer A中加入18 ml 無水乙醇，充分混勻。
Wash buffer B中加入64 ml無水乙醇，充分混勻。
儲存條件：請按照上表中注意事項的條件保存，其他未說明的可常溫或4度保存。
步驟：
1、樣品處理
全血：取50-300 μl全血，加入3倍體積的紅細胞裂解液，震蕩混勻，12000rpm離心1min，
去上清。加入600 μl Lysis Buffer A，震蕩混勻。
禽血：加入10-100 μl禽血，直接加入600 μl Lysis Buffer A，顛倒混勻。
動物組織：取20-50mg動物組織，液氮研磨或勻漿，加入100 μl PBS重懸樣品，
然后加入到準備好的600 μl Lysis Buffer A，振蕩混勻。
動物細胞：離心收集10⁵-10⁶個培養(yǎng)細胞，加入100 μl PBS重懸細胞，
加入600 μl Lysis Buffer A，震蕩混勻。
2、加入10 μl Proteinase K，60 ℃水浴20 min～40 min，其間顛倒混勻數次。
如需消化RNA,可待樣品裂解*后加入10 μl RNase A，混勻，室溫放置10 min。
若加入樣品較多，可適當延長水浴時間，適量增加Proteinase K的量，按比例增加
Lysis Buffer A和Lysis Buffer B量。
3、加入400 μl Lysis Buffer B，漩渦震蕩30 s。
4、 12,000 rpm離心5 min，將上清轉入離心柱中，靜置2 min。

上清可能出現少量白色漂浮物，此為未消化*的細胞和蛋白質。

5、 12,000 rpm離心1 min，棄廢液。
6、加入700 μl Wash buffer A（使用前請先檢查是否已加入無水乙醇），12,000 rpm離心 1min，棄廢液。
7、加入700 μl Wash buffer B（使用前請先檢查是否已加入無水乙醇）， 12,000 rpm離心 1min，棄廢液。
8、加入500 μl Wash buffer B，12,000 rpm離心1 min，棄廢液。
9、再次12,000 rpm離心2 min，將離心柱置于新的離心管中，并打開離心柱蓋，于室溫或37 ℃恒溫箱放置5~10min，
直至無明顯乙醇味。
10、在硅基質膜中央加入50～200 μl Elution Buffer或雙蒸水(事先預熱55～65 ℃)，置于室溫2 min，12,000 rpm離2 min。
所得液體即為基因組DNA溶液。